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Muse疟疾检测试剂盒快速检测疟原
疟疾俗称“打摆子”,每年的4月25日是世界防治疟疾日。目前,疟疾流行区依然主要分布在非洲、东南亚、东地中海、西太平洋地区和美洲地区,其中以撒哈拉沙漠以南的非洲地区疟疾发病率最高,我国早在年首次实现了本地疟疾病例零报告,但是,每年仍有大量的输入性病例,所以疟疾仍是不容忽视的传染病之一,此外,针对恶性疟的抗疟药的耐药性增加也是控制该病的主要问题。因此,可用于各种实验室环境的快速有效的检测方法已成为发现新抗疟药的关键。
目前检测疟疾的主要方法是抗原检测法(快速诊断实验RTD)、疟原虫镜检和核酸检测法,但是均存在一定的弊端,如灵敏性和特异性低、受主观因素干扰及成本高昂等。针对以上问题,Luminex公司研发出了简单易行、灵敏度高且成本经济的检测试剂盒:Muse?MalariaP.f.-P.v.DetectionKit和Muse?RBCInvasionKit,与Luminex公司的细胞分析仪Guava?Muse?搭配使用,使针对疟疾的检测达到了一个新的高度。
Guava?Muse?细胞分析仪疟疾检测相关试剂盒
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Muse?P.f./P.v.疟疾抗原检测试剂盒
Muse?疟疾抗原检测试剂盒(Muse?MalariaP.f.-P.v.DetectionKit)基于磁珠的抗原捕获技术,用于检测人全血、疟原虫感染的RBC培养物和疟原虫抗原标准品等各种样品中恶性疟原虫和间日疟原虫的抗原及其分型。通过检测恶性疟组氨酸蛋白2(HRP2),恶性疟乳酸脱氢酶(Pf-LDH)和间日疟乳酸脱氢酶(Pv-LDH)来鉴定疟疾感染的类型,其特异性、可重复性强,操作简便,无需专人负责实验,且样本使用量少(20微升)。
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原理
将三种磁珠分别与识别特定疟原虫抗原(恶性疟原虫HRP2、恶性疟原虫LDH和间日疟原虫LDH)的抗体偶联,并通过生物素与带有荧光的链霉亲和素结合放大检测信号。通过与阴性磁珠进行比较,可以轻松获得阳性磁珠(即抗原反应)的检测结果。
基于磁珠的抗原抗体偶联反应
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基本流程(1h)
样本加入裂解液,离心,分别加入不同磁珠、抗体以及带有荧光的链霉亲合素进行孵育,在磁力架上静置片刻,上机检测即可,并可快速获取、输出结果。
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结果
分别检测全血中的P.f.-LDH和P.v.-LDH及稀释后冰冻血液样本的P.falciparum和P.vivax,结果如下图:
A.检测全血中P.f.-LDH和P.v.-LDH,分别是0ng/mg,0.5ng/ml,2ng/ml,4ng/ml,结果显示具有良好的灵敏度,且二者之间无干扰
B.检测稀释后冰冻血液样本的P.falciparum和P.vivax,验证其高灵敏度与特异性,该样本已通过显微镜确认过寄生虫浓度
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Muse?红细胞感染检测试剂盒
Muse?红细胞感染检测试剂盒(Muse?RBCInvasionkit)利用荧光染料,可轻松快速地检测和量化RBC培养物或全血样本中疟原虫感染的红细胞比例,结果精确,采用免洗的方法,最大程度的节约样本(5微升),适用于筛查疟疾培养物,药物研发及评估血样的感染程度。
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原理
利用一种荧光染料来检测和定量感染的红细胞。成熟的红细胞是无细胞核的,通常不会被DNA染料染色。在红细胞受疟原虫感染期间,有细胞核的疟原虫侵入并感染了红细胞,因此DNA染色呈阳性。网状红细胞通常以低百分比存在,主要含有RNA,并且与DNA结合染料的结合力较低。由于感染和未感染的红细胞染色不同,因此可以区分和鉴定疟原虫感染的红细胞。该试剂盒采用特殊配制的核酸染料和缓冲液,在操作过程中不会引起红细胞的分解或破裂,其结果表明RBC中存在寄生虫感染,结合Muse?P.f./P.v.DetectionKit或其它检测方法使用,可进一步验证疟疾感染的发生。
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基本流程(~30min)
将样本与工作液混合,孵育后,加入缓冲液并完成上机检测,简单快速获取结果。
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结果
重复检测不同恶性疟原虫株感染后的寄生虫血症样本,并分析其CV值。
不同恶性疟原虫株感染的红细胞
寄生虫血症样本,重复检测3次/样本。计算其CV值,感染率1%,CV10%;感染率1%,CV15%
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小结
Muse?疟疾检测试剂盒是疟疾相关研究中强有力的检测工具,两种试剂盒与简单易用的Muse?强强联合,指导研究者快速完成样本的数据采集和分析,且可在多种不同的环境中提供简便易行的操作和快速有效的数据信息。
长按