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疟疾及疟疾检测
疟疾及疟疾检测
疟疾,英文名malaria,在中国俗称打摆子,古人在解释“疟”字的时候说,“疟者,残虐之意”。世界卫生组织年报告全球有个国家流行疟疾,33亿人受到疟疾的威胁,每年约2.47亿人感染疟疾,多万人死于疟疾,其中多数为非5岁以下儿童。
近年来,连云港检验检疫局严把国门安全,特别注重对非洲归国人员的医学排查,近年来已连续在归国人员中检出约50例疟疾感染者,有些疟原虫种类还是江苏口岸首次发现。
那么问题来了,疟疾是什么样的疾病?是如何检测出来的呢?下面让连云港检验检疫局工作人员为您一一分解:
大家首先来看看疟疾分布地区:是不是很广?大半个非洲,南美洲、东南亚、太平洋岛国都有,我国南方地区也有疟疾分布。
疟疾的传播媒介为按蚊,别的蚊子不传播哦!主要传播途径为雌性按蚊叮咬,在我国疟疾传播媒介有多种,其中最主要的媒介是中华按蚊。喂,右下角那只蚊子,说的就是你!
疟疾的病原
疟疾的病原为寄生于红细胞的疟原虫。疟原虫种类繁多,能感染人类的疟原虫主要有4种,就像人类有四种人种一样。它们分别为恶性疟原虫(这个最坏)、间日疟原虫、三日疟原虫和卵形疟原虫。我国以恶性疟疾和间日疟疾为主,偶尔有国外传入性三日和卵形疟疾。
疟疾的典型症状为突发的寒战高热,寒战持续10分钟到2小时,同时伴有体温迅速上升,通常可达40°以上,全省酸痛乏力,但神志清楚,无明细中毒症状。发热持续2-6小
时后,开始大汗,体温骤降,自觉明显缓解,仍感明显乏力。以上症状是不是好难受!赶紧诊断接着治疗啊!
疟疾的诊断:诊断疟疾,最可靠的鉴别办法仍靠病原学确定,这时传染病实验室就派上用场了,现在就大家介绍几种常用的检测方法:
第
一
种
火眼金睛法)当然就是最原始,也是金标准,就是显微镜检查!检出疟疾的病原体—疟原虫,是明确疟疾的最直接证据,目前常用的是厚、薄血膜法。这里还的提到法国军医拉威朗laveran,年他通过显微镜观察病人血液,看到大量的黑色素小体,还有含黑色素的白细胞和不规则的透明色素小体,以及新月形的小体,他断定这就是疟疾的病原体。后来经过证实,而他本人也因此在年获得诺贝尔奖。
显微镜检查:第一步是采集病人的血液
按要求涂厚薄血膜图片(一看就知道是专家里手)
甲醇固定,用配好的吉姆萨染液对其进行10-20分钟的染色
下面就是在显微镜下观察了
油镜下观察个视野,再根据镜下的影像的特点,对疟原虫进行分型,如图所示
显微镜检测具有操作简便、可鉴别虫种,价廉的优点,广泛用于疟疾的诊断,检测范围为50-个/ul,(正常人每微升血液里有几百万个红细胞),缺点是需要经验丰富的专业镜检人员,检测时间较长,在病人发热的时候采集血液效果较好,如果病人发热之前服用了相关的抗疟药物后则严重影响显微镜的检测效果。
第二种·方法
立等可取法(RDT)
疟原虫快速检测卡反应原理是抗原抗体反应,制作反应卡使用了单克隆抗体技术和膜层析技术,针对疟原虫产生的并在感染个体血液中存在的特定抗原,如LDH及HRPⅡ等酶和蛋白质进行检测。快速检测法比较简单实用,只需要采集病人的一滴外周血,加入反应卡的检测孔内,再滴入适量的检测缓冲液,等待20分钟观察反应结果。反应区出现检测线出现就是阳性,就是这么简单!
下图为一例连云港出入境检验检疫局从赤道几内亚归国人员中检出的输入性恶性疟疾
有些快速诊断检测法可检测到多个种属(恶性疟原虫、间日疟原虫、三日疟原虫和卵形疟原虫),还有一些可进一步甄别恶性疟和非恶性疟感染,或者特定种属感染。
快速检测法优点是不需要专业人员,稍加培训即可完成操作,在15至30分钟之内就可得出结果,而且先前服用抗疟药物也可检测。缺点是检测下限较高,在个/ul左右。
第三种
A就是现在比较流行的分子生物学方法啦!高科技!有普通PCR法,荧光定量PCR法,LAMP恒温扩增检测法,高分辨曲线HARM法等等,现在以荧光定量PCR法检测举例说明。
聚合酶链反应(polymerasechainreaction,PCR)是一种体外酶促扩增特异DNA片断的技术。PCR是利用针对目的基因所设计的一对特异寡核苷酸引物,以目的基因为模板进行的DNA体外合成反应。在短时间内可获得大量目的基因,反应体系中加入了荧光探针,可以实时了解反应进度。上个核酸扩增示意图吧。有没有觉得难懂?反应过程其实就像谣言传播一样,一传十,十传百,扩增速度很快。
配置好Taq聚合酶,DNTP、镁离子、缓冲液等反应体系需要的物质,加入PCR反应管内,
在专用的荧光定量PCR仪上设置好反应条件,就可以上机检测啦。
上图为典型的呈S型阳性曲线,曲线越靠左说明模板中的特定核酸含量越高,阴性结果则是一条直线。
荧光定量PCR的优点是敏感度高,其检测下限可以达到达到1copy/ul,相当于在一个50米长的标准游泳池内倒入一杯果汁!其特异性强,可以借助引物设计来区分疟原虫的种类。缺点是费用较高,需要特殊的仪器,对操作人员要求也较高。
通过以上的介绍,大家是否get到一点疟疾检测的知识呢?
在此连云港检验检疫局小编还得提醒大家,在国外疟疾流行区工作、生活的同时,要做好以下预防措施:
1、消灭蚊虫,防止蚊虫叮咬。按蚊最喜欢在室内外犄角旮旯的锅、盆、瓦、罐或坑洼地的积水中孳生,所以要“翻缸倒罐,清除积水”,消灭孳生地。
2、外出时穿长袖衣裤以及戴帽子等遮住裸露的皮肤。
3、其他身体裸露部位最好还是按说明涂含有避蚊胺成分的驱蚊药。
4、在有蚊帐保护的地方睡觉。
5、有症状,尽快就医
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